Dica do autor: O ensaio imunoenzimático ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) é uma técnica laboratorial amplamente utilizada para detecção de antígenos ou anticorpos em diversas amostras biológicas. Sua principal vantagem está na alta sensibilidade e especificidade, além da possibilidade de automatização e uso em larga escala, como em programas de triagem populacional. Existem diferentes variações do ELISA, cada um com aplicações clínicas distintas..

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O ELISA indireto, por exemplo, é indicado para detecção de anticorpos em pacientes, sendo amplamente utilizado na triagem para HIV, hepatites virais, toxoplasmose, entre outras. Nesse modelo, o antígeno do patógeno é previamente fixado em uma placa, e a presença de anticorpos específicos na amostra é detectada por um anticorpo secundário conjugado a uma enzima, que gera uma reação de cor visível e quantificável.

Alternativa A: INCORRETA. O ELISA competitivo não é indicado especificamente para vírus envelopados nem mede atividade enzimática intracelular em culturas celulares. Ele é usado principalmente quando se quer detectar pequenas moléculas ou antígenos em baixa concentração, e funciona por competição entre antígeno da amostra e antígeno ligado à placa pelo sítio de ligação do anticorpo.

Alternativa C: INCORRETA. O ELISA tipo sandwich é usado para detectar antígenos, e não sequências genômicas virais — essas são detectadas por técnicas de biologia molecular, como PCR. Além disso, ele depende do uso de anticorpos específicos (captura e detecção), ambos ligados a enzimas, e é altamente eficaz no diagnóstico de hepatite B, mas não é o método preferido para hepatite C.

Alternativa D: INCORRETA. A separação eletroforética em gel de poliacrilamida é característica do Western blot, e não faz parte do ELISA. O ELISA é realizado em placas de microtitulação e não envolve eletroforese.

Alternativa E: INCORRETA. Uma das vantagens do ELISA é justamente sua capacidade de detectar infecções crônicas, como a toxoplasmose, pela presença de anticorpos IgG persistentes. O teste consegue diferenciar entre infecção recente (IgM) e infecção antiga (IgG), o que é essencial em contextos como gestação.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências:

1. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. Microbiologia. 11ª ed. Porto Alegre: Artmed; 2017.
2. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiologia Médica. 9ª ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2021.
3. Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. Diagnóstico Microbiológico: Texto e Atlas Colorido. 7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2018.
4. Crowther JR. The ELISA Guidebook. 2nd ed. Methods in Molecular Biology, vol 516. Humana Press; 2009.