Dica do autor: O cloranfenicol atua na subunidade 50S bacteriana, ligando-se ao centro catalítico da peptidil transferase, a enzima responsável por unir covalentemente o grupo carboxila do peptidil-tRNA no sítio P ao grupo amino do aminoacil-tRNA no sítio A. Ao impedir essa reação, bloqueia-se o alongamento da cadeia polipeptídica logo após a entrada do novo aminoácido. Esse mecanismo explica seu efeito bacteriostático na maioria dos microrganismos, embora possa ser bactericida contra alguns agentes específicos. A toxicidade hematológica, como anemia aplásica idiossincrática, está relacionada à ação do cloranfenicol sobre ribossomos mitocondriais humanos, que se assemelham aos bacterianos. Reconhecer o papel central da formação da ligação peptídica é essencial para resolver esta questão.

Alternativa A: INCORRETA. A iniciação ocorre na subunidade 30S com o pareamento do tRNA iniciador ao códon AUG no RNAm, processo que depende de fatores de iniciação (IF1, IF2, IF3 em bactérias). O cloranfenicol não interage com a subunidade 30S nem afeta essa montagem inicial do ribossomo, atuando somente quando a cadeia polipeptídica já está em crescimento.

Alternativa B: CORRETA. A formação da ligação peptídica é catalisada pela peptidil transferase, uma atividade da subunidade 50S que posiciona corretamente o peptidil-tRNA no sítio P e o aminoacil-tRNA no sítio A para permitir a reação química. O cloranfenicol se liga diretamente ao local ativo dessa enzima, impedindo a reação de transferência e, assim, interrompendo o alongamento da proteína.

Alternativa C: INCORRETA. A translocação é a etapa em que o ribossomo se move três nucleotídeos no sentido 5’ → 3’ ao longo do RNAm, deslocando o tRNA do sítio A para o P e liberando o sítio A para o próximo aminoacil-tRNA. Esse passo é catalisado por fatores de elongação (EF-G em bactérias) e é inibido por macrolídeos, não pelo cloranfenicol.

Alternativa D: INCORRETA. O reconhecimento do códon de parada ocorre na fase de terminação e depende de fatores de liberação (RF1, RF2 em bactérias), que promovem a hidrólise da ligação entre a proteína e o tRNA no sítio P. O cloranfenicol não atua nesta etapa final e não interfere no desligamento do polipeptídeo.

Alternativa E: INCORRETA. A entrada do aminoacil-tRNA no sítio A ocorre durante o alongamento e é mediada por EF-Tu em bactérias, que traz o tRNA carregado de aminoácido para o sítio correto. O cloranfenicol atua depois desse passo, quando o aminoácido já está no sítio A e a ligação peptídica deveria ser formada.

Resposta correta: Alternativa B

Referências:

• Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al. Molecular Biology of the Cell. 6th ed. New York: Garland Science; 2014.
• Lodish H, Berk A, Zipursky SL, et al. Molecular Cell Biology. 7th ed. New York: W. H. Freeman; 2012.
• Cooper GM. The Cell: A Molecular Approach. 7th ed. Sunderland (MA): Sinauer Associates; 2019.