Dica do autor: Para a adequada interpretação de uma biópsia renal, especialmente em casos de suspeita de doença túbulo-intersticial, é fundamental a utilização de técnicas histológicas que evidenciem, de forma clara e contrastante, as diferentes estruturas renais. A coloração de Hematoxilina e Eosina (H&E) é uma das mais utilizadas na rotina laboratorial por proporcionar uma visão global da arquitetura tecidual. Embora muitas vezes seja descrita como um corante básico, a hematoxilina, na verdade, precisa ser oxidada para sua forma ativa (hematina) e associada a um mordente, geralmente alumínio, para atuar como um corante catiônico (básico), ligando-se a componentes ácidos, como os ácidos nucleicos. Isso confere aos núcleos uma coloração azul-arroxeada característica. Já a eosina é um corante ácido que cora proteínas citoplasmáticas e componentes extracelulares em tons róseos.

O processo de coloração H&E envolve etapas técnicas sistemáticas, como: desparafinização, hidratação em série decrescente de álcoois, coloração com hematoxilina, lavagem em água corrente, coloração com eosina. Cada uma dessas etapas influencia diretamente na qualidade da coloração final.

A fase de desidratação e reidratação é particularmente crítica, pois garante a penetração adequada dos corantes. Se houver falhas nessa etapa — como tempo inadequado ou solventes contaminados — podem surgir artefatos, como coloração fraca, excesso de eosina ou má definição nuclear. Portanto, o domínio técnico do processo é tão importante quanto a escolha do corante para garantir uma boa análise histológica.

Por outro lado, o Tricrômico de Mallory, uma técnica que emprega uma combinação de três corantes (geralmente azul de anilina, fucsina ácida e laranja G), é especialmente útil para evidenciar a matriz extracelular, principalmente fibras colágenas, que são coradas em azul intenso. Isso a torna indispensável na avaliação de fibrose intersticial e espessamento da membrana basal – alterações frequentes em doenças túbulo-intersticiais. A escolha entre essas colorações depende do objetivo da análise: enquanto a H&E fornece uma visão geral e celular, o tricrômico destaca elementos da matriz e compartimentos extracelulares.

Alternativa A: INCORRETA. Embora a H&E permita a visualização básica da matriz extracelular, ela não é a coloração ideal para avaliação de fibrose intersticial. O Tricrômico de Mallory ou o Tricrômico de Masson são preferidos justamente por sua capacidade de corar intensamente o colágeno, o que facilita a identificação de áreas fibróticas. Assim, essa alternativa inverte os papéis das colorações.

Alternativa B: INCORRETA. A coloração de Mallory não é indicada para avaliação de alterações nucleares finas. Para esse fim, a H&E é a técnica mais apropriada, pois a hematoxilina, ao corar os ácidos nucleicos, proporciona excelente definição nuclear, permitindo avaliar aspectos como hipercromasia, cariolise, picnose ou pleomorfismo.

Alternativa C: CORRETA. Essa alternativa descreve com precisão o princípio e a aplicação da H&E. A hematoxilina, ao ser ativada e associada a mordentes, liga-se a componentes ácidos como o DNA e o RNA, corando os núcleos em azul-arroxeado, enquanto a eosina cora as proteínas do citoplasma em tons róseos. Essa combinação permite uma excelente visualização geral da arquitetura tecidual, sendo amplamente utilizada na avaliação inicial de amostras histológicas.

Alternativa D: INCORRETA. O estudo da densidade mitocondrial exige técnicas específicas como a coloração de PAS ou técnicas de microscopia eletrônica. O tricrômico, embora útil para a visualização de matriz extracelular e membranas basais, não tem boa sensibilidade para organelas intracelulares como mitocôndrias.

Alternativa E: INCORRETA. Essa alternativa generaliza erroneamente os princípios das colorações. Embora ambas utilizem reações ácido-básicas, o Tricrômico de Mallory utiliza corantes adicionais e tem finalidade distinta, sendo específico para colágeno e matriz extracelular. Assim, há sim diferenças significativas entre elas, principalmente na visualização de membranas basais e fibrose, onde o tricrômico é superior.

Resposta correta: Alternativa C

Referências bibliográficas:

• JUNQUEIRA, Luiz Carlos; CARNEIRO, José. Histologia Básica. 14ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2016.
• ROSS, Michael H.; PAWLINA, Wojciech. Histologia: Texto e Atlas. 8ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2020,
• KIERZENBAUM, Abraham; TRES, Laura. Histologia e Biologia Celular: Uma Introdução à Patologia. 4ª ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2013.
• YOUNG, Barbara; O'DOWD, Geraldine; WOODFORD, Philippa. Wheater Histologia Funcional: Texto e Atlas Colorido. 6ª ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2015.