Dica do autor: O SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) é uma técnica essencial para a análise de proteínas em laboratório, especialmente útil para estimar seu peso molecular aparente e verificar a pureza da amostra. O SDS é um detergente aniônico potente que desnatura completamente as proteínas, ou seja, rompe suas estruturas secundária, terciária e quaternária, deixando apenas a estrutura primária intacta. Durante esse processo, o SDS se liga às cadeias polipeptídicas em proporção constante (~1,4 g de SDS por 1 g de proteína), conferindo uma carga negativa uniforme e mascarando a carga nativa dos aminoácidos. Com isso, todas as proteínas adquirem razão carga/massa semelhante, o que permite que a separação durante a migração no gel ocorra exclusivamente com base no tamanho molecular: proteínas menores migram mais rapidamente pelos poros da matriz de poliacrilamida, enquanto proteínas maiores são retardadas. Esse princípio é o que torna o SDS-PAGE tão confiável para a caracterização comparativa de proteínas, independentemente de sua forma nativa ou carga original.

Alternativa A: INCORRETA. O SDS não promove precipitação seletiva de proteínas na matriz do gel. Pelo contrário, ele mantém as proteínas solúveis e carregadas, possibilitando sua migração uniforme durante a eletroforese.

Alternativa B: INCORRETA. O objetivo do SDS é justamente eliminar a influência da carga nativa, tornando-a uniforme entre diferentes proteínas. A separação não depende da composição de aminoácidos, mas sim da massa molecular.

Alternativa C: INCORRETA. A mobilidade não é determinada por afinidade com a matriz ou interações hidrofóbicas, mas sim pela diferença de tamanho. A matriz de poliacrilamida atua como uma peneira molecular.

Alternativa D: CORRETA. O princípio fundamental do SDS-PAGE é a desnaturação completa das proteínas associada à uniformização da carga negativa via ligação com SDS. Isso garante que a separação ocorra exclusivamente com base na massa molecular da cadeia polipeptídica, independentemente de sua conformação nativa.

Alternativa E: INCORRETA. As interações quaternárias são perdidas no processo de desnaturação promovido pelo SDS. A técnica avalia subunidades individuais, não complexos oligoméricos.

Resposta correta: Alternativa D

Referências:

• Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2017). Lehninger: Princípios de Bioquímica. 7ª edição. Artmed.
• Scopes, R. K. (1994). Protein Purification: Principles and Practice. 3ª edição. Springer.
• Laemmli, U. K. (1970). Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature.