Dica do autor: O teste ELISA por competição é uma técnica sofisticada usada para quantificar anticorpos neutralizantes, que é especialmente útil em estudos de resposta imunológica a terapias biológicas. A precisão desta técnica depende fortemente da competição entre os antígenos para garantir uma avaliação precisa.   Alternativa A: CORRETA. Neste tipo de ELISA, o antígeno marcado é fundamental, pois compete com o antígeno no soro do paciente pelos sítios de ligação do anticorpo. A proporção de antígeno marcado que se liga ao anticorpo (que é inversamente proporcional à quantidade de anticorpo no soro do paciente) é medida, proporcionando uma estimativa quantitativa da presença de anticorpos neutralizantes.   Alternativa B: INCORRETA. Utilizar anticorpos secundários marcados não se alinha com o princípio do ELISA por competição, que é medir a competição entre o antígeno marcado e o não marcado pelo sítio de ligação do anticorpo.   Alternativa C: INCORRETA. A introdução de uma alta concentração de anticorpos monoclonais não é a estratégia desejada em um ELISA por competição, já que o foco está em medir a competição entre antígenos marcados e não marcados, e não entre anticorpos.   Alternativa D: INCORRETA. Utilizar múltiplos antígenos não relacionados pode confundir os resultados, introduzindo complexidades desnecessárias e potenciais fontes de erro, pois a especificidade pode ser comprometida.   Alternativa E: INCORRETA. Embora uma lavagem adequada seja importante para remover anticorpos não ligados e não específicos, não é a estratégia central para configurar um ELISA por competição, que depende principalmente da dinâmica da competição entre antígenos marcados e não marcados.   Resposta correta: Alternativa A.