Dica do autor: A importação nuclear de proteínas que contêm um sinal de localização nuclear (NLS) é um processo ativo, altamente regulado, que envolve proteínas carreadoras chamadas importinas e a pequena GTPase Ran. O ciclo de Ran é fundamental para conferir direcionalidade ao transporte. No citoplasma, Ran está predominantemente na forma Ran-GDP, enquanto no núcleo a ação da RanGEF (Ran Guanine Nucleotide Exchange Factor) converte Ran-GDP em Ran-GTP.

Durante a importação, o complexo proteína-NLS + importina atravessa o poro nuclear; no interior do núcleo, a ligação de Ran-GTP à importina promove a dissociação da proteína importada, liberando-a no nucleoplasma. Se a RanGEF for inibida, não haverá produção eficiente de Ran-GTP no núcleo, o que impede a liberação da carga — bloqueando o processo e levando ao acúmulo da proteína no citoplasma. Esse é um exemplo clássico de como a maquinaria de transporte nuclear depende do gradiente de Ran-GTP entre núcleo e citoplasma.

Fonte: doi: 10.3390/v13050829 (adaptado)

Alternativa A: CORRETA: A RanGEF nuclear é essencial para converter Ran-GDP em Ran-GTP, criando a alta concentração de Ran-GTP no núcleo necessária para que a importina libere a proteína transportada. Sem Ran-GTP, o complexo proteína-importina não se dissocia, impedindo a importação efetiva.

Alternativa B: INCORRETA: A formação do complexo proteína-importina ocorre no citoplasma e não depende diretamente da RanGEF. O reconhecimento do NLS e a ligação inicial à importina não são afetados pela conversão de Ran-GDP em Ran-GTP.

Alternativa C: INCORRETA: A difusão passiva pelo poro nuclear é restrita a moléculas pequenas (<5 kDa) e não é o mecanismo envolvido aqui. Proteínas maiores precisam de transporte ativo mediado por importinas, e o bloqueio não está na difusão, mas na etapa de dissociação no núcleo.

Alternativa D: INCORRETA: O NLS geralmente não é clivado após o transporte — ele permanece na proteína. A RanGEF não tem função de clivagem de NLS; sua função é exclusivamente catalisar a troca de GDP por GTP em Ran.

Alternativa E: INCORRETA: Esse mecanismo descreve a exportação nuclear, que envolve exportinas e Ran-GTP no núcleo. O problema aqui não é a saída, mas sim a entrada da proteína no núcleo, portanto não se aplica ao caso.

Resposta correta: Alternativa A.

Referências:

ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 7. ed. Porto Alegre: Artmed, 2023.
LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 9. ed. Porto Alegre: Artmed, 2022.
COOPER, Geoffrey M.; HAUSMAN, Robert E. A célula: uma abordagem molecular. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2020.