Dica do autor: Durante a replicação do DNA, a célula precisa garantir que os nucleotídeos sejam incorporados com extrema precisão, para evitar mutações espontâneas. As DNA polimerases eucarióticas envolvidas na replicação (principalmente as polimerases δ e ε) possuem um sítio catalítico polimerásico, que adiciona nucleotídeos, e um sítio E (de “editing”), responsável pela atividade exonucleásica 3’ → 5’. Esse sítio atua como uma “ferramenta de revisão” ou proofreading, detectando quando um nucleotídeo incorreto foi inserido — por exemplo, quando há um pareamento de base instável. Quando isso ocorre, a polimerase retrocede, translocando o DNA do sítio catalítico para o sítio E, onde o nucleotídeo mal incorporado é removido. A fita então retorna ao sítio polimerásico para continuar a replicação. Essa função é essencial para a fidelidade da replicação, e sua falha, como descrito no enunciado, leva a acúmulo de mutações pontuais, mesmo que os mecanismos de reparo pós-replicativos estejam funcionando normalmente. Assim, o sítio E atua como uma linha de defesa primária contra erros de replicação, reduzindo significativamente a taxa de mutações.

Alternativa A: INCORRETA. A iniciação da síntese da nova fita de DNA é realizada pela DNA polimerase α, que atua junto com a primase para sintetizar o primer. O sítio E não tem relação com essa etapa.

Alternativa B: INCORRETA. A abertura da dupla hélice é função da helicase, e o sítio E da DNA polimerase não participa desse processo. As funções são distintas e ocorrem em diferentes etapas do maquinário replicativo.

Alternativa C: INCORRETA. A interação com o PCNA (anel deslizante) é importante para aumentar a processividade da DNA polimerase, mas ocorre em outra região da enzima, não no sítio E. O PCNA ajuda a manter a polimerase associada ao DNA, mas não participa diretamente do proofreading.

Alternativa D: CORRETA. O sítio E das DNA polimerases replicativas (δ e ε) possui atividade exonucleásica 3’ → 5’, que permite a remoção de nucleotídeos incorretamente incorporados. Essa função é o proofreading, essencial para manter a fidelidade da replicação e evitar mutações pontuais.

Alternativa E: INCORRETA. Quem sela as quebras na cadeia de DNA após a substituição dos primers é a DNA ligase, não o sítio E da DNA polimerase. Essa etapa é posterior à replicação e tem função estrutural de ligação entre fragmentos.

Resposta correta: Alternativa D.

Referências:

• ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.

• LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2021.

• COOPER, Geoffrey M.; HAUSMAN, Robert E. Biologia molecular e celular: uma abordagem de problemas. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019.

• KARP, Gerald. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 8. ed. São Paulo: Cengage Learning, 2016.