Dica do autor: Em eucariotos, a garantia de que cada origem de replicação dispare apenas uma vez por ciclo depende do licenciamento das origens. No fim de G1, o ORC (Origin Recognition Complex) se liga às origens e recruta Cdc6 e Cdt1 para carregar a helicase MCM2-7, formando o pré-complexo de replicação (pré-RC). Ao entrar em fase S, CDKs e DDK ativam as origens (firing) e, ao mesmo tempo, inibem nova montagem de pré-RC: Cdt1 é bloqueada pela geminina e degradada (ex.: via CRL4^Cdt2/PCNA); Cdc6 é fosforilada e exportada/degradada; e o próprio ORC sofre regulações que impedem re-licenciamento. Assim se cumpre a regra do “uma e somente uma vez”.
Se uma mutação em ORC prejudica essa regulação, origens já ativadas podem ser re-licenciadas e reativadas ainda na mesma fase S, levando a super-replicação, conflitos de forquilhas, estresse replicativo e quebras de dupla fita — exatamente o fenótipo descrito.

Alternativa A: INCORRETA. Em eucariotos, o análogo das SSB é a RPA. Um defeito nela causaria estagnação das forquilhas e maior instabilidade de fita simples, mas não explica a reativação repetida de origens nem a super-replicação.

Alternativa B: CORRETA. Perda da regulação temporal do licenciamento — isto é, falha no mecanismo que assegura que cada origem ative uma única vez por ciclo — permite re-licenciamento em S e leva à super-replicação e DSBs. Esse é o defeito clássico associado a anomalias em ORC/Cdc6/Cdt1/geminina.

Alternativa C: INCORRETA. Topoisomerase defeituosa gera superenrolamento, quebras e colapso de forquilhas, mas não causa múltiplos disparos na mesma origem durante S.

Alternativa D: INCORRETA. DNA ligase defeituosa leva a acúmulo de fragmentos de Okazaki e quebras na fita atrasada, porém não promove reativação de origens nem super-replicação.

Alternativa E: INCORRETA. Uma helicase (MCM) mutante tende a reduzir a eficiência de iniciação/elongação; não explica origens disparando repetidamente.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências:

• ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.

• LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2021.

• COOPER, Geoffrey M.; HAUSMAN, Robert E. Biologia molecular e celular: uma abordagem de problemas. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019.

• KARP, Gerald. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 8. ed. São Paulo: Cengage Learning, 2016.