Dica do autor: o processamento histológico consiste em etapas fundamentais para transformar um fragmento biológico em uma lâmina interpretável ao microscópio. Essa sequência inicia-se pela fixação, uma etapa crítica, realizada imediatamente após a obtenção da amostra, com o objetivo de preservar a estrutura tecidual, interromper o metabolismo celular, prevenir a degradação enzimática, eliminar microrganismos patogênicos e manter a morfologia o mais próxima possível do estado in vivo. O fixador mais utilizado é o formol a 10%, mas há outros com usos específicos, como o Bouin, ideal para tecidos delicados como testículo e baço, e o glutaraldeído, preferido em microscopia eletrônica pela sua excelente preservação de membranas.

Após a fixação, o tecido é submetido à inclusão, etapa essencial para permitir cortes ultrafinos e reprodutíveis. Ela envolve diversas etapas: lavagem, desidratação (geralmente em álcool), clarificação, embebição em parafina líquida e resfriamento. O bloco de parafina endurecido é, então, cortado em seções muito finas, com o auxílio de um micrótomo. A qualidade dessa etapa impacta diretamente na fidelidade da análise microscópica, após a montagem da lâmina.

Por fim, a amostra passa pela coloração, que tem papel crucial na diferenciação visual dos componentes celulares. Essa fase explora as propriedades químicas do tecido, especialmente as interações ácido-base, permitindo destacar núcleos, citoplasmas, fibras e outras estruturas. O método mais utilizado é a coloração de hematoxilina e eosina (HE). A hematoxilina, embora geralmente classificada como corante básico, não atua como um corante convencional, já que precisa formar um complexo com um mordente metálico (como sais de alumínio) para se ligar ao tecido – especialmente aos ácidos nucleicos, conferindo coloração azulada aos núcleos. A eosina, por outro lado, é um corante ácido que se liga às proteínas citoplasmáticas, corando-as de rosa a vermelho. A coloração, portanto, não apenas embeleza a lâmina, mas fornece informações críticas sobre a composição e o estado funcional do tecido.

Fonte: Criado por IA

Alternativa A: INCORRETA. A fixação não tem como função principal aumentar o contraste das estruturas – essa é, na verdade, a função da coloração. Além disso, a inclusão não dissolve lipídeos celulares; ao contrário, muitas vezes os lipídeos são extraídos durante a desidratação com solventes orgânicos. E a coloração não preserva a integridade do tecido durante o corte – essa preservação é função da parafina na etapa de inclusão.

Alternativa B: CORRETA. A fixação, de fato, interrompe o metabolismo celular e estabiliza as estruturas morfológicas, prevenindo degradações. A inclusão permite a infiltração do tecido com parafina, o que possibilita cortes finos e bem definidos. A coloração, como explicado, diferencia estruturas celulares com base em propriedades químicas, especialmente por interações ácido-base e afinidades tintoriais.

Alternativa C: INCORRETA. A fixação não remove resíduos de solventes – essa função, se existe, seria atribuída às etapas de lavagem ou diafanização, mas não à fixação. A inclusão, ao contrário do que afirma a alternativa, envolve desidratação progressiva do tecido, não hidratação. E a coloração não elimina proteínas desnaturadas; ao contrário, ela evidencia essas proteínas por afinidade tintorial.

Alternativa D: INCORRETA. Embora o endurecimento do tecido ocorra para facilitar o corte, isso é resultado da inclusão em parafina, e não da fixação. A inclusão não tem como função remover pigmentos endógenos – essa seria uma preparação especial em casos muito específicos. E a coloração não neutraliza ácidos nucleicos – pelo contrário, a hematoxilina os destaca seletivamente.

Alternativa E: INCORRETA. A fixação pode ser um pré-requisito para análise em microscopia eletrônica, mas a visualização tridimensional exige preparação e fixadores específicos, como o glutaraldeído, o que não é descrito na questão. A inclusão não transforma lipídeos em compostos insolúveis, e muitos lipídeos são removidos durante o processo. Por fim, a coloração não atua exclusivamente na membrana plasmática – ela interage com diferentes estruturas celulares, como núcleos, citoplasma, fibras colágenas etc.

Resposta correta: Alternativa B

Referências bibliográficas:

• Ross, M. H., & Pawlina, W. (2016). Histologia: Texto e Atlas (7ª ed.). Rio de Janeiro: Guanabara Koogan.

• Junqueira, L. C., & Carneiro, J. (2013). Histologia Básica (12ª ed.). Rio de Janeiro: Guanabara Koogan.