Dica do autor: A reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) representa um avanço notável em relação ao PCR convencional, pois permite detectar e quantificar o DNA (ou RNA, com etapa de transcrição reversa) em tempo real. Diferentemente do PCR tradicional, que exige a análise final por eletroforese, o qPCR monitora a amplificação gênica a cada ciclo, com base em sinais fluorescentes, proporcionando resultados rápidos, sensíveis e quantitativos.

Essa técnica utiliza corantes como o SYBR Green, que se ligam ao DNA de dupla fita, ou sondas específicas marcadas com fluoróforos (como TaqMan), que emitem fluorescência proporcional à quantidade de DNA amplificado. A aplicação clínica é ampla e inclui desde o monitoramento da carga viral em infecções por HIV, hepatite B e C, até a detecção precoce de infecções respiratórias virais, como SARS-CoV-2, com alto grau de precisão e confiabilidade.

Alternativa A: INCORRETA. A descrição se refere à cultura bacteriana em meio sólido com mensuração indireta de crescimento, e não à técnica de qPCR, que não envolve colônias, nem quantificação por densidade óptica após 48h.

Alternativa C: INCORRETA. O qPCR não depende da formação de gradiente de pH, nem da lise bacteriana para diferenciação de enterobactérias. Essas características não fazem parte dos princípios da biologia molecular, mas sim de métodos bioquímicos ou de cultivo.

Alternativa D: INCORRETA. O corante de Gram é uma técnica de coloração bacteriana, e não tem qualquer aplicação na qPCR. A técnica de PCR não permite visualizar microrganismos em tempo real, mas sim a fluorescência gerada pela amplificação do DNA.

Alternativa E: INCORRETA. O qPCR é amplamente utilizado para detectar vírus de RNA, como HIV, SARS-CoV-2, Influenza, entre outros, desde que precedido de uma etapa de transcrição reversa (RT-qPCR). Também pode ser usado para fungos, bactérias e protozoários, não sendo limitado a fungos filamentares.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências:

1. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. Microbiologia. 11ª ed. Porto Alegre: Artmed; 2017.
2. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiologia Médica. 9ª ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2021.
3. Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. Diagnóstico Microbiológico: Texto e Atlas Colorido. 7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2018.
4. Mackay IM, Arden KE, Nitsche A. Real-time PCR in virology. Nucleic Acids Res. 2002;30(6):1292–1305.