Dica do autor: As alterações estruturais cromossômicas são variações no arranjo físico dos cromossomos que podem ter consequências clínicas importantes, mesmo quando não alteram o número total de cromossomos visível em um cariótipo convencional. Essas anomalias incluem microdeleções, microduplicações, inversões, translocações equilibradas ou desequilibradas, entre outras. Por se tratarem, muitas vezes, de alterações submicroscópicas (menores que 5 Mb), técnicas de citogenética clássica, como o cariótipo por bandeamento G, podem não detectá-las.

Para esses casos, a hibridização fluorescente in situ (FISH) é uma técnica altamente eficaz. Ela utiliza sondas de DNA marcadas com fluorocromos que se hibridizam com sequências específicas do genoma, permitindo a visualização direta de regiões cromossômicas específicas tanto em metáfases quanto em núcleos interfásicos. Isso permite a localização exata de genes ou regiões genômicas de interesse e a detecção de alterações estruturais como deleções, duplicações ou translocações, mesmo quando não visíveis ao microscópio ótico convencional. A FISH é amplamente usada no diagnóstico de síndromes genéticas (ex: Síndrome de DiGeorge, Williams), neoplasias hematológicas (como leucemias), e para mapeamento gênico.

Alternativa A: CORRETA. A FISH permite a detecção de alterações cromossômicas específicas com alta sensibilidade e precisão locacional. É indicada especialmente para microdeleções e translocações que não são detectadas pelo cariótipo convencional, utilizando sondas fluorescentes que se ligam ao DNA alvo em cromossomos metafásicos ou interfásicos.

Alternativa B: INCORRETA. A eletroforese capilar é usada para separar ácidos nucleicos ou proteínas com base na carga elétrica, mas não permite localização genômica específica de alterações estruturais nos cromossomos.

Alternativa C: INCORRETA. A imunohistoquímica identifica modificações epigenéticas ou expressão de proteínas em tecidos, mas não é usada para análise estrutural cromossômica ou detecção de microdeleções.

Alternativa D: INCORRETA. A cromatografia líquida de alta performance (HPLC) é útil na detecção de metabólitos e distúrbios metabólicos, mas não detecta alterações cromossômicas estruturais nem tem aplicação citogenética.

Alternativa E: INCORRETA. A espectrometria de massa é utilizada em proteômica e metabolômica, com foco em quantificação e identificação de proteínas, mas não permite avaliação direta de alterações cromossômicas.

Resposta correta: Alternativa A.

Referências:

• Nussbaum RL, McInnes RR, Willard HF. Genética Médica Thompson & Thompson. 8ª ed. Elsevier, 2017.

• Korf BR, Rehm HL. Modern Human Genetics. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2013.

• Shaffer LG, Slovak ML, Campbell LJ. An International System for Human Cytogenetic Nomenclature (ISCN). S. Karger, 2016.