Dica do autor: O Southern blot, desenvolvido por Edwin Southern em 1975, é um método clássico e extremamente importante na biologia molecular. Ele permite detectar sequências específicas de DNA entre muitos fragmentos de uma amostra genômica.
O princípio da técnica baseia-se na hibridização complementar entre fitas de DNA. Primeiro, o DNA é extraído e fragmentado com enzimas de restrição. Em seguida, esses fragmentos são separados por eletroforese em gel de agarose, transferidos para uma membrana de nitrocelulose ou náilon, e finalmente expostos a uma sonda marcada (radioativa, fluorescente ou quimicamente).

Se a sonda for complementar à sequência de interesse, ela se ligará especificamente a essa região, produzindo um sinal detectável que confirma a presença do gene alvo.
Essa técnica é usada para:

• Confirmar a presença e o número de cópias de genes recombinantes em organismos geneticamente modificados;
  
  

• Detectar mutações estruturais (deleções, inserções, rearranjos) no DNA;
  
  

• Analisar perfis de restrição (RFLP – Restriction Fragment Length Polymorphism), úteis em estudos de paternidade e identificação forense.
  
  

O Southern blot foi um marco histórico na transição para as tecnologias genômicas modernas, pois forneceu o princípio da hibridização molecular, base também de métodos mais recentes, como microarranjos e sondas FISH.

Alternativa A: INCORRETA. O Northern blot detecta RNA mensageiro, não DNA.

Alternativa B: CORRETA. O Southern blot detecta DNA específico por hibridização com uma sonda marcada, sendo a técnica descrita no enunciado.

Alternativa C: INCORRETA. O Western blot detecta proteínas, usando anticorpos específicos, não DNA.

Alternativa D: INCORRETA. A PCR em tempo real amplifica DNA e mede expressão, mas não utiliza hibridização em membrana.

Alternativa E: INCORRETA. A eletroforese capilar separa fragmentos de DNA, mas não identifica sequências específicas por sondas.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências bibliográficas:

• LEHNINGER, A. L. Princípios de Bioquímica. 8ª ed. Artmed, 2022.
  
  

• WATSON, J. D. et al. Molecular Biology of the Gene. 8th ed. Pearson, 2023.
  
  

• SOUTHERN, E. M. Journal of Molecular Biology, 1975;98(3):503–517 — “Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis.”
  
  

• HARPER, D. Harper’s Illustrated Biochemistry. 32nd ed. McGraw-Hill, 2023.
  
  

• VOET, D.; VOET, J. G. Biochemistry. 5th ed. Wiley, 2021.