Dica do autor: A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma das técnicas mais revolucionárias da biologia molecular moderna, sendo base fundamental para inúmeras aplicações clínicas e biotecnológicas. Desenvolvida por Kary Mullis em 1983, a PCR permite amplificar regiões específicas do DNA de maneira exponencial, a partir de quantidades mínimas de material genético.
O princípio básico consiste em ciclos repetitivos de desnaturação, anelamento (hibridização) e extensão, mediados por uma DNA polimerase termoestável (como a Taq polimerase de Thermus aquaticus). Esses ciclos geram milhões de cópias de um fragmento-alvo em poucas horas.

Na medicina, a PCR é amplamente utilizada em:

• Diagnóstico molecular, detectando mutações genéticas, como BRCA1/BRCA2 no câncer de mama hereditário;
  
  

• Identificação de agentes infecciosos, como vírus (HIV, SARS-CoV-2) e bactérias;
  
  

• Testes forenses e de paternidade, analisando DNA em amostras mínimas;
  
  

• Monitoramento de tratamento oncológico, com detecção de DNA tumoral circulante (cfDNA).
  
  

O sucesso da PCR se deve à sua sensibilidade (capaz de detectar até uma única cópia de DNA) e especificidade (determinada pelo desenho dos primers). Com a evolução tecnológica, surgiram variantes como RT-PCR (transcrição reversa seguida de PCR) para RNA, e qPCR (PCR quantitativa em tempo real), que permite quantificar o número de cópias de DNA ou RNA.

Assim, o uso da PCR para detectar mutações no DNA tumoral circulante representa um dos maiores avanços da medicina personalizada, permitindo diagnósticos precoces, acompanhamento de terapias e identificação de recidivas de forma não invasiva — a chamada biópsia líquida.

Alternativa A: INCORRETA. A espectrometria de massas é usada para análise de proteínas e metabólitos, não para amplificação de DNA.

Alternativa B: CORRETA. A PCR baseia-se na amplificação seletiva de fragmentos de DNA por ação da DNA polimerase termoestável, sendo o método descrito no enunciado.

Alternativa C: INCORRETA. Tradução reversa de RNA em proteínas não existe biologicamente; o termo correto seria “tradução”, que ocorre nos ribossomos.

Alternativa D: INCORRETA. A eletroforese separa fragmentos de DNA conforme seu tamanho, mas não amplifica nem detecta mutações por si só.

Alternativa E: INCORRETA. As enzimas de restrição apenas cortam o DNA, e a síntese recombinante depende de outros processos, não da amplificação.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências bibliográficas:

• LEHNINGER, A. L. Princípios de Bioquímica. 8ª ed. Artmed, 2022.
  
  

• WATSON, J. D. et al. Molecular Biology of the Gene. 8th ed. Pearson, 2023.
  
  

• HARPER, D. Harper’s Illustrated Biochemistry. 32nd ed. McGraw-Hill, 2023.
  
  

• SAIKI, R. K. et al. Science, 1985;230(4732):1350–1354 — “Enzymatic amplification of β-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia.”