Dica do autor: a PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) é uma proteína da cinta deslizante (sliding clamp) fundamental no processo de replicação do DNA em células eucarióticas. Ela forma um anel que se prende ao DNA e serve como plataforma para manter a DNA polimerase firmemente associada à fita molde. Essa interação é crucial para a processividade da replicação, ou seja, para que a polimerase consiga sintetizar longos trechos de DNA sem se dissociar. Uma mutação que comprometa a ligação entre PCNA e DNA polimerase resulta em uma síntese intermitente ou incompleta, com dissociações frequentes da enzima. Esse efeito é ainda mais crítico em regiões GC-ricas, que formam estruturas secundárias como g-quadruplexes ou alças em grampos de cabelo, que exigem maior estabilidade da replicação. Portanto, a perda da interação entre PCNA e a DNA polimerase leva diretamente à queda na processividade da replicação, o que resulta em replicação incompleta ou falhas replicativas localizadas.

Alternativa A: INCORRETA. A helicase é responsável pela separação das fitas da dupla hélice, mas sua afinidade pela forquilha não depende da PCNA. Embora regiões GC-ricas sejam mais difíceis de abrir, a PCNA não regula diretamente a helicase.

Alternativa B: CORRETA. A deficiência de interação entre PCNA e DNA polimerase compromete a processividade da replicação, o que significa que a polimerase se dissocia prematuramente do DNA. Isso causa falhas na elongação, principalmente em regiões estruturalmente complexas como áreas GC-ricas.

Alternativa C: INCORRETA. A remoção de primers de RNA é realizada por outras enzimas, como DNA polimerase I (em procariontes) ou nucleases e FEN1 (em eucariotos). A PCNA participa de processos coordenados com essas enzimas, mas a sua mutação não impede diretamente a remoção de primers, nem a formação de ligações fosfodiéster.

Alternativa D: INCORRETA. A primase atua antes da DNA polimerase, sintetizando os primers de RNA. Ela não se liga diretamente à PCNA de forma funcional crítica para sua atividade, e a formação de primers nos telômeros está mais associada à telomerase, não à PCNA.

Alternativa E: INCORRETA. A topoisomerase II regula o superenrolamento do DNA, mas não é ativada pela PCNA, tampouco induz quebras aberrantes como consequência de mutações nessa proteína. Essa alternativa foge da lógica molecular descrita no enunciado.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências:

• ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.

• COOPER, Geoffrey M.; HAUSMAN, Robert E. Biologia molecular: os genes e as células. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019.

• KARP, Gerald. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 8. ed. Rio de Janeiro: LTC, 2020.

• LEHNINGER, Albert L. et al. Princípios de bioquímica. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2021.

• LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017.

• MOLDAVSKY, Hugo; VIVANCO, A. PCNA: Estructura, funciones y mecanismos de regulación. Revista de Biología Molecular, v. 30, n. 2, p. 55–67, 2020.