Dica do autor: A imagem acima ilustra os princípios da coloração histológica baseada em interações ácido-base, fundamentais para a correta visualização de estruturas celulares sob o microscópio óptico. Os corantes básicos (cátions com carga positiva) interagem com estruturas ácidas e negativamente carregadas, como ácidos nucleicos (DNA e RNA), produzindo coloração azul ou roxa nos núcleos. Já os corantes ácidos (ânions com carga negativa) se ligam a estruturas básicas, geralmente proteínas citoplasmáticas, conferindo uma coloração rosa a vermelha ao citoplasma.

A coloração por hematoxilina-eosina (H&E) é uma das técnicas mais utilizadas em histologia, especialmente em biópsias gástricas, como no caso citado na questão. A hematoxilina é classificada como um corante básico, porém, não é solúvel em água em sua forma pura, nem atua diretamente por meio de ligações eletrostáticas. Para que tenha atividade corante, ela precisa ser oxidada em hemateína, o verdadeiro agente corante, que se liga a um mordente metálico, geralmente sais de alumínio, formando um complexo que adquire afinidade por estruturas ácidas, como o DNA e o RNA nucleares, gerando a coloração azul característica.

Essa interação é profundamente influenciada pelo pH do meio. Em pH ácido (4–5), as estruturas ácidas celulares mantêm ou intensificam sua carga negativa, o que favorece a ligação com o complexo hemateína-mordente, tornando a coloração dos núcleos mais intensa e bem definida. Já em pH alcalino (8–9), essa interação é enfraquecida, tanto pela menor ionização das estruturas nucleares quanto pela possível instabilidade do complexo corante, o que reduz a intensidade da coloração nuclear. Paralelamente, em meio mais alcalino, a eosina (um corante ácido) encontra ambiente favorável para interagir com proteínas citoplasmáticas — que são estruturas básicas —, intensificando a coloração rósea do citoplasma.

Essa variação na coloração não é apenas estética, mas pode comprometer significativamente a interpretação diagnóstica. Em especial em quadros como gastrite autoimune, onde a análise da arquitetura glandular, da densidade linfocitária e da atrofia glandular depende da clareza da distinção entre núcleo e citoplasma, uma coloração nuclear atenuada pode mascarar alterações significativas.

Fonte: Criado por IA.

Alternativa A: INCORRETA. Em pH ácido, os grupos fosfato do DNA não perdem sua carga negativa; ao contrário, eles a mantêm ou até intensificam, o que favorece a ligação com corantes básicos como a hematoxilina (na forma de hemateína com mordente). Essa afirmação inverte o comportamento bioquímico das estruturas ácidas em pH baixo.

Alternativa B: INCORRETA. A eosina, como corante ácido, não possui afinidade por estruturas basofílicas, mas sim por estruturas eosinofílicas, ou seja, aquelas com caráter básico, como proteínas citoplasmáticas. Além disso, seu desempenho é melhorado em ambientes mais alcalinos, não ácidos.

Alternativa C: CORRETA. A hematoxilina (na forma oxidada, hemateína) é um corante básico que, ao se combinar com um mordente metálico, ganha afinidade por estruturas ácidas. Em pH ácido, essas estruturas mantêm suas cargas negativas, aumentando a afinidade com o complexo corante e resultando em coloração azul intensa dos núcleos. Essa é a explicação mais completa e condizente com a observação histológica apresentada.

Alternativa D: INCORRETA. Corantes básicos não têm afinidade por proteínas citoplasmáticas, que são estruturas básicas e, portanto, interagem com corantes ácidos, como a eosina. Além disso, a coloração nuclear não se intensifica em pH alcalino, mas sim se atenua, como descrito no próprio enunciado.

Alternativa E: INCORRETA. Embora o pH possa afetar a ionização dos corantes, aumentar o pH não favorece a ligação da hematoxilina com o DNA, pois essa ligação depende da presença de cargas negativas no DNA, que são menos disponíveis em pH alcalino. Isso resulta em coloração nuclear mais fraca, não mais intensa.

Resposta correta: Alternativa C

Referências bibliográficas:

• Ross, M.H.; Pawlina, W. Histologia: Texto e Atlas. 7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2016.

• Junqueira, L.C.; Carneiro, J. Histologia Básica. 12ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2013.

• Kiernan, J.A. Histological and Histochemical Methods: Theory and Practice. 5th ed. Scion Publishing Ltd, 2015.

• Bancroft, J.D.; Gamble, M. Theory and Practice of Histological Techniques. 8th ed. Elsevier, 2018.