Dica do autor: A microscopia é uma das ferramentas diagnósticas mais fundamentais e imediatas da microbiologia clínica, permitindo a visualização direta de microrganismos em amostras clínicas, especialmente quando os resultados laboratoriais mais complexos ainda não estão disponíveis.

Entre as técnicas mais importantes estão:

• Coloração de Gram
• Microscopia de campo escuro
•  Ziehl-Neelsen
• Microscopia com azul de metileno
• Microscopia eletrônica

A coloração de Ziehl-Neelsen, também chamada de coloração para bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR), é um método essencial para o diagnóstico de tuberculose e outras infecções causadas por micobactérias, como Mycobacterium tuberculosis. Esse microrganismo possui uma parede celular rica em ácido micólico, que o torna resistente à descoloração pelo álcool ácido após a coloração com fucsina básica.  A observação é feita com microscopia óptica comum, sendo uma técnica simples, acessível e de grande valor clínico em países com alta prevalência da doença.

Alternativa A: INCORRETA. A coloração de Gram é usada para bactérias, distinguindo entre Gram-positivas e Gram-negativas com base na estrutura da parede celular, e não é usada para vírus, que são acelulares e não possuem parede bacteriana, cápside visível por essa técnica, nem estrutura lipídica corável com Gram.

Alternativa B: INCORRETA. A microscopia de campo escuro é indicada principalmente para organismos muito finos e espiralados, como espiroquetas, por exemplo, Treponema pallidum. Ela não é usada para bacilos entéricos Gram-negativos, como Klebsiella pneumoniae, cuja visualização e identificação se fazem por coloração de Gram e cultura em meios seletivos, como ágar MacConkey.

Alternativa D: INCORRETA. A microscopia eletrônica de varredura (MEV) tem uso mais restrito à pesquisa científica e não é utilizada rotineiramente em laboratórios clínicos, muito menos para triagem de infecções fúngicas cutâneas, que são diagnosticadas por exame direto com KOH ou coloração por Grocott ou PAS, seguidos de cultura.

Alternativa E: INCORRETA. A coloração com azul de metileno é uma técnica simples usada para avaliação morfológica básica, como diferenciar células vivas e mortas ou observar leveduras e bactérias, mas não tem capacidade de discriminar sorotipos virais, pois vírus não são visíveis por microscopia óptica convencional.

Resposta correta: Alternativa C.

Referências:

1. Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. Diagnóstico Microbiológico: Texto e Atlas Colorido. 7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2018.
2. Tortora GJ, Funke BR, Case CL. Microbiologia. 11ª ed. Porto Alegre: Artmed; 2017.
3. Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Microbiologia Médica. 9ª ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2021.
4. Harvey RA, Champe PC, Fisher BD. Microbiologia – Lippincott Ilustrado. 2ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2010.