Dica do autor: As enzimas de restrição, também chamadas endonucleases de restrição, são proteínas bacterianas que reconhecem sequências específicas de DNA — geralmente palindrômicas — e realizam o corte das fitas duplas. Algumas enzimas fazem cortes simétricos, gerando extremidades chamadas “blunt ends” (ou extremidades cegas), enquanto outras realizam cortes desalinhados, quebrando as fitas em pontos diferentes. Isso resulta em extremidades simples com nucleotídeos desemparelhados, conhecidas como extremidades coesivas ou “sticky ends”. Essas extremidades são complementares e autopareáveis, facilitando a ligação entre diferentes fragmentos de DNA que foram cortados pela mesma enzima. A formação de moléculas recombinantes depende dessa compatibilidade e posterior ação da DNA ligase para selar as ligações fosfodiésteras.

Alternativa A: INCORRETA. Todos os fragmentos de DNA, mesmo após clivagem, permanecem como duplas hélices nas regiões que não foram cortadas. “Fragmentos duplamente helicoidais” não é um termo técnico adequado para descrever as extremidades geradas pelas enzimas de restrição.

Alternativa B: INCORRETA. As extremidades circulares autosselantes seriam características de plasmídeos fechados, mas o corte por enzimas de restrição interrompe essa circularidade. O conceito de "autosselante" não se aplica às extremidades após clivagem.

Alternativa C: INCORRETA. As pontes dissulfeto ocorrem entre resíduos de cisteína em proteínas e não têm qualquer relação com a estrutura do DNA ou com os cortes realizados por enzimas de restrição.

Alternativa D: CORRETA. As extremidades coesivas, também chamadas de “sticky ends”, são geradas quando enzimas de restrição realizam cortes desalinhados, deixando nucleotídeos desemparelhados que podem se ligar facilmente a outros fragmentos com extremidades complementares.

Alternativa E: INCORRETA. As extremidades cegas (blunt ends) são geradas por enzimas que cortam diretamente entre os pares de bases, produzindo extremidades alinhadas e não complementares, o que dificulta a ligação com outros fragmentos sem auxílio de técnicas adicionais.

Resposta correta: Alternativa D

Referências:

• NELSON, D. L.; COX, M. M. Lehninger: princípios de bioquímica. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2021.
• RODWELL, V. W. Bioquímica ilustrada de Harper. 31. ed. Porto Alegre: AMGH, 2021.
• DEVLIN, T. M. Bioquímica: manual do estudante. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2022.