Dica do autor: Durante a replicação do DNA em células eucarióticas, a fidelidade replicativa é mantida por uma série de mecanismos altamente coordenados, entre os quais se destaca a atividade de proofreading (revisão) realizada pelas DNA polimerases δ e ε. Essa atividade depende de um sítio exonucleásico 3’ → 5’ presente na estrutura da enzima. Quando a DNA polimerase incorpora um nucleotídeo incorreto, ela detecta a falha por instabilidade na pareação de bases e desvio conformacional. A enzima então retrocede, remove o nucleotídeo errado utilizando sua atividade exonucleásica 3’ → 5’, e em seguida, retoma a síntese corretamente. Quando essa função está comprometida por mutações estruturais, a enzima perde sua capacidade de correção, o que leva ao acúmulo de erros no DNA recém-sintetizado e, consequentemente, aumento da taxa de mutações espontâneas. Esse é um dos principais mecanismos que garantem a fidelidade genética e sua falha está associada a instabilidade genômica, podendo contribuir para doenças como câncer.

Alternativa A: INCORRETA. A primase é importante para iniciar a replicação, mas não participa da revisão de erros de pareamento. Sua disfunção poderia impedir o início da replicação, mas não justificaria o aumento específico de mutações por pareamento incorreto.

Alternativa B: CORRETA. A atividade exonucleásica 3’ → 5’ é essencial para o proofreading feito pelas DNA polimerases δ e ε. A sua deficiência impede a remoção de nucleotídeos mal pareados, resultando em falhas na correção dos erros cometidos durante a síntese, o que explica diretamente o aumento da taxa de mutações observada.

Alternativa C: INCORRETA. A topoisomerase atua aliviando tensões do DNA durante sua abertura, mas não tem relação com a fidelidade de pareamento de bases. Sua inativação comprometeria o avanço da forquilha, mas não justificaria o acúmulo de mutações por erro de pareamento.

Alternativa D: INCORRETA. A DNA ligase é essencial para a junção dos fragmentos de Okazaki na fita retardatária, mas não interfere na identificação ou correção de erros de pareamento. Sua disfunção geraria quebras na fita recém-sintetizada, mas não explicaria o aumento de mutações pontuais.

Alternativa E: INCORRETA. O PCNA (proliferating cell nuclear antigen) é um fator de processividade que atua como um "anel deslizante" para a DNA polimerase, não para a helicase. Além disso, ele não está diretamente envolvido no reconhecimento e remoção de nucleotídeos incorretos.

Resposta correta: Alternativa B.

Referências:

• ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.

• LEHNINGER, Albert L.; NELSON, David L.; COX, Michael M. Princípios de bioquímica. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2021.

• LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017.

• SADAVA, David et al. Biologia: volume único. 11. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019.

• SINGER, Burton E. Genética: um enfoque conceitual. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2021.