Dica do autor: a replicação do DNA em células eucarióticas ocorre em etapas bem definidas: inicia-se com o reconhecimento da origem de replicação pelo complexo ORC, seguido pela montagem do pré-complexo de replicação, recrutamento da helicase MCM, ativação das polimerases e, por fim, o processo de elongação, onde ocorre a síntese efetiva das novas fitas. Se há ativação adequada do ORC e formação do pré-replicador, mas os dados mostram ausência de fragmentos de Okazaki, acúmulo de fita simples desemparelhada, e instabilidade genômica, o problema não está na iniciação, mas sim na elongação. Esse é o momento em que a DNA polimerase realiza a síntese contínua da fita líder e descontínua da fita retardada, produzindo os fragmentos de Okazaki, que estão ausentes no cenário descrito. O acúmulo de DNA desemparelhado também sugere que as fitas estão sendo abertas, mas não estão sendo replicadas, o que indica falha na ação da polimerase ou em sua associação funcional com outras proteínas essenciais, como PCNA ou primase.

Alternativa A: INCORRETA. A terminação da replicação ocorre somente ao final da duplicação, com a reliberação das polimerases e religação das últimas regiões replicadas. No caso descrito, a replicação nem chegou a avançar, e não há evidências de falha nesse estágio final.

Alternativa B: INCORRETA. A DNA ligase atua após a elongação, selando os fragmentos de Okazaki com ligações fosfodiéster. Ainda que sua falha pudesse causar problemas, não explicaria a ausência dos próprios fragmentos, que indicam que eles nunca foram sintetizados.

Alternativa C: INCORRETA. A falha na correção de erros (proofreading) comprometeria a fidelidade da replicação, mas não impediria a síntese de DNA nem causaria ausência de fragmentos ou acúmulo de DNA desemparelhado.

Alternativa D: CORRETA. A elongação é a etapa em que ocorre a síntese efetiva das novas fitas de DNA pela DNA polimerase, tanto de forma contínua na fita líder, quanto descontínua na fita retardada (com formação dos fragmentos de Okazaki). A ausência desses fragmentos, aliada ao acúmulo de fitas desemparelhadas e instabilidade genômica, indica claramente um bloqueio funcional na elongação, seja por falha da polimerase, da primase, da PCNA ou de fatores auxiliares de processividade.

Alternativa E: INCORRETA. O reconhecimento da origem de replicação pelo ORC está descrito como funcional no enunciado, portanto essa etapa já foi superada. O problema se manifesta após essa fase.

Resposta correta: Alternativa D.

Referências:

• ALBERTS, Bruce et al. Biologia molecular da célula. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2017.

• COOPER, Geoffrey M.; HAUSMAN, Robert E. Biologia molecular: os genes e as células. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019.

• KARP, Gerald. Biologia celular e molecular: conceitos e experimentos. 8. ed. Rio de Janeiro: LTC, 2020.

• LEHNINGER, Albert L. et al. Princípios de bioquímica. 8. ed. Porto Alegre: Artmed, 2021.

• LODISH, Harvey et al. Biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017.