Dica do autor: Esta questão desafia os alunos a conceber um plano experimental para explorar a função de uma enzima chave na replicação e reparo do DNA, como a RecQ1, e seu papel na predisposição ao câncer. Avaliar o impacto de uma variante genética na funcionalidade de uma proteína crítica exige uma abordagem multifacetada que possa elucidar tanto o mecanismo molecular subjacente quanto as possíveis vias para intervenção terapêutica. Alternativa A: INCORRETA. Embora a imunoprecipitação possa revelar interações proteicas importantes, este método sozinho não fornece uma compreensão completa do impacto funcional da variante genética na atividade de RecQ1 ou na estabilidade genômica. Alternativa B: CORRETA. Utilizar a tecnologia CRISPR-Cas9 para criar linhagens celulares com deficiência específica em RecQ1 permite uma análise direta do papel da enzima na manutenção da estabilidade genômica, na replicação do DNA, e na resposta ao estresse replicativo. Comparar essas linhagens com células tipo selvagem pode elucidar o impacto funcional da variante genética e identificar vulnerabilidades que podem ser exploradas terapeuticamente. Alternativa C: INCORRETA. A microscopia de fluorescência oferece insights valiosos sobre a localização celular e a dinâmica de proteínas, mas não aborda diretamente a funcionalidade alterada de RecQ1 devido à variante genética nem identifica alvos terapêuticos. Alternativa D: INCORRETA. O sequenciamento de exoma pode identificar mutações colaborativas em pacientes, mas não avalia diretamente o impacto da variante RecQ1 na função enzimática ou na estabilidade genômica. Alternativa E: INCORRETA. Desenvolver inibidores de RecQ1 e testar sua eficácia pode ser uma estratégia para explorar possíveis intervenções terapêuticas; no entanto, sem uma compreensão prévia do impacto funcional da variante genética, essa abordagem pode ser prematura. Resposta correta: Alternativa B.