Dica do autor: A fase inicial da descoberta de fármacos, conhecida como triagem de compostos bioativos, é um passo crucial no desenvolvimento de medicamentos modernos. Para acelerar esse processo, pesquisadores utilizam a técnica conhecida como High-throughput screening (HTS), ou triagem de alta eficiência, que permite testar milhares de substâncias simultaneamente, em experimentos altamente automatizados, com precisão e economia de tempo. Essa abordagem é aplicada, por exemplo, em linhagens celulares tumorais cultivadas em placas, nas quais se avaliam parâmetros como viabilidade celular, EC50 (concentração eficaz para 50% da resposta máxima) e Emax (efeito máximo alcançado pelo composto). O objetivo é identificar moléculas com atividade biológica promissora e perfil toxicológico aceitável, que possam seguir para fases mais detalhadas da pesquisa. O HTS é uma ferramenta central na farmacologia experimental e na biotecnologia farmacêutica, e se tornou indispensável para projetos de descoberta racional de novos medicamentos.

Alternativa A: INCORRETA. A espectroscopia de massa é uma técnica analítica potente para identificação e caracterização de compostos químicos, incluindo análise de pureza. No entanto, ela não é utilizada para triagem funcional de atividade biológica em células, como descrito no enunciado. Sua função é complementar, e não a principal na triagem inicial de fármacos.

Alternativa B: INCORRETA. O docking molecular é uma técnica computacional usada para prever como uma molécula interage com seu alvo biológico, como proteínas ou ácidos nucleicos. Apesar de ser importante na fase in silico, ela não substitui a triagem experimental em células e não avalia parâmetros como EC50 ou viabilidade celular, que são obtidos por ensaios bioquímicos laboratoriais.

Alternativa C: INCORRETA. O Western Blotting é uma técnica que detecta proteínas específicas em amostras biológicas, sendo muito utilizada para investigar a expressão proteica após estímulos. Contudo, ela não tem aplicabilidade para testar centenas ou milhares de compostos simultaneamente e não é empregada como método de triagem em larga escala.

Alternativa D: INCORRETA. As culturas tridimensionais de organoides são modelos celulares avançados que simulam tecidos humanos e são úteis para estudar absorção, toxicidade e eficácia de fármacos. Apesar do valor translacional, esse modelo não é viável para triagem de alto volume, devido ao custo e complexidade. Portanto, não é a técnica descrita no enunciado.

Alternativa E: CORRETA. A técnica mencionada é claramente o High-throughput screening (HTS), que permite realizar ensaios automatizados com grande número de compostos simultaneamente, utilizando leitores ópticos e softwares analíticos para medir respostas celulares como viabilidade, toxicidade, EC50 e Emax. Essa metodologia otimiza a identificação de moléculas candidatas a fármacos e está presente em praticamente todos os centros modernos de pesquisa farmacêutica.

Resposta correta: Alternativa E.

Referências:

• BRUNTON, Laurence L. et al. As bases farmacológicas da terapêutica de Goodman & Gilman. 13. ed. Porto Alegre: AMGH, 2019.

• LILIENBLUM, Wolfgang et al. Alternative methods to safety studies in experimental animals: role in the risk assessment of chemicals under the new European chemicals legislation (REACH). Archives of Toxicology, v. 82, n. 4, p. 211–236, 2008.

• ANVISA – Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Guia para realização de estudos não clínicos de segurança necessários ao desenvolvimento de medicamentos. Brasília: ANVISA, 2013.
  Disponível em: https://www.gov.br/anvisa/pt-br. Acesso em: 10 jun. 2025.

• HUGHES, James P. et al. Principles of early drug discovery. British Journal of Pharmacology, v. 162, n. 6, p. 1239–1249, 2011.

• BARRETT, Jeffrey S.; KRESS, Barry. High-Throughput Screening in Drug Discovery. Annual Reports in Medicinal Chemistry, v. 33, p. 367–373, 1998.