Desde que a infecção por SARS-COV-2 tornou-se endêmica novos métodos diagnósticos vêm sendo estudados, incluindo o teste RT-LAMP de COVID-19, realizado através da saliva. Tais estudos são extremamente importantes, pois conforme a pandemia avança, técnicas diagnósticas mais rápidas e baratas se fazem necessárias, ampliando o contingente de pessoas testadas e, assim, evitando a propagação do vírus.
O teste RT-LAMP (sigla em inglês para “transcrição reversa seguida por amplificação isotérmica mediada por loop”) é um teste molecular que identifica o RNA viral na amostra de pessoas infectadas durante a fase ativa do vírus. Ele já era utilizado na detecção de outros vírus, como Dengue, Zika e Chikungunya e vem ganhando força como teste diagnóstico de COVID-19.
Como funciona o teste pela saliva RT-LAMP?
Esta modalidade de teste pode ser realizada em farmácias, laboratórios ou até mesmo em casa e geralmente tem um custo entre 90 e 170 reais. A amostra coletada é a própria saliva, de 2 a 5ml, que deve ser armazenada em um tubo coletor. O material pode ser conservado por até 3 dias em temperatura ambiente.
Fonte: https://www.saopaulo.sp.gov.br/ultimas-noticias/producao-de-teste-que- detecta-coronavirus-em-uma-hora-tem-investimento-da-desenvolve-sp/
Assim como o RT-PCR, o RT-LAMP, inclui uma etapa de transcrição reversa (RT), na qual o RNA é transformado em DNA. Em seguida, regiões específicas do vírus são amplificadas milhares de vezes, em temperatura fixa, por cerca de uma hora.
O teste identifica se o indivíduo está infectado com o vírus naquele momento, e não é capaz de detectar infecções prévias. Ele é recomendado entre o 3° e 7° dia de sintomas ou no 7° dia após exposição ao vírus, sendo que o resultado sai em até 24h.
Quais são as vantagens?
O RT-LAMP é realizado a partir da saliva do paciente, de modo que não há o incômodo e a dor provocados pela introdução do swab na nasofaringe, que é a amostra mais utilizada atualmente. Isso incentiva mais pessoas a realizarem o teste, e torna viável a coleta de crianças e idosos. Um exemplo é a escola Avenues, em São Paulo, que disponibiliza testes RT-LAMP para alunos e funcionários semanalmente, como forma de rastrear a possível circulação do vírus entre assintomáticos. Em janeiro, o colégio retomou as aulas já com os testes semanais, e desde então contabiliza menos de 1% de casos positivos para Covid-19 entre seus os frequentadores.
Além disso, o teste pode ser realizado pelo paciente sozinho, sem auxilio de um profissional da saúde, muitas vezes em sua própria casa. Isso garante menos exposição e risco de contaminação, além de gerar uma economia em equipamentos de proteção individual.
O procedimento utilizado pelo teste RT-LAMP utiliza reagentes comuns e equipamentos já utilizados por grande parte dos laboratórios, facilitando sua reprodução em todo o mundo. Isso permite que mais testes sejam realizados por dia e, assim, mais pessoas entram em quarentena mais cedo, diminuindo o contágio da infecção.
Qual a diferença entre RT-PCR e RT-LAMP?
O RT-PCR (do inglês “Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction”) é um teste molecular que detecta a presença do material genético do vírus na amostra coletada do indivíduo. Essa amostra pode ser obtida da saliva, da orofaringe ou da nasofaringe, sendo esta última a considerada mais fidedigna. Sua coleta pode ser desconfortável, já que o swab precisa coletar material na nasofaringe, local altamente contaminado pelo vírus SARS-COV-2.
Fonte: http://glorinha.rs.gov.br/gov/glorinha-conquista-mais-de-200-exames-swabs/
O teste RT-PCR realizado através da saliva ainda passa por estudos, pois não há um veredicto sobre sua sensibilidade. Existem vários trabalhos indicando que talvez a estratégia perca um pouco no quesito sensibilidade para a coleta de secreção nasofaríngea, em 5% ou 10%. Um estudo recente realizado entre a população pediátrica da cidade de Araraquara (SP), demonstrou a eficácia da amostra da saliva no RT-PCR: “Ao todo, 10 crianças tiveram o diagnóstico positivo para a Covid-19. As amostras por swab e por saliva detectaram oito positivos cada uma, mostrando uma performance igual entre as amostras”, conforme pode ser lido no link: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2021.03.29.21254566v1.full.
Com relação a sensibilidade entre RT-LAMP e RT-PCR com secreção da naso/orofaringe, ainda não há um consenso. Um trabalho inicial do laboratório Mendelics e do hospital Sírio-Libanês incluiu 244 pacientes, que apresentavam sintomas sugestivos de covid-19 de 1 há 7 dias. Os dados divulgados como pre-print revelam que o uso da técnica RT-LAMP para análise da saliva obteve 78,9% de sensibilidade, em comparação com 85,5% da RT-PCR para análise da secreção orofaríngea, sendo que a especificidade de ambos testes foi de 100%. O estudo completo pode ser lido no link: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.10.27.20220541v1.
Além do protocolo ser mais simples e rápido do que o RT-PCR, o RT-LAMP não requer o uso de aparelhos laboratoriais complexos, como termociclador em tempo real. Isso permite que o exame seja realizado em muito mais laboratórios e, portanto, promove a testagem em massa.
Conclusão
Segundo a OMS, a melhor maneira de enfrentar a pandemia de COVID-19 é a testagem em massa. O diagnóstico precoce permite o rápido isolamento social, evitando a infecção de mais indivíduos e, ainda, permite que o governo tenha um panorama geral da situação do país, indicando o melhor momento e lugar para afrouxamento das medidas sanitárias.
Atualmente, existem diversos testes diagnósticos de COVID-19 no mercado brasileiro, tanto para detectar a presença de vírus ativo quanto para verificar uma infecção prévia, conforme mostra a tabela abaixo.
O RT-LAMP é uma ótima forma diagnóstica, principalmente quando envolvemos um público alvo específico, como crianças e idosos. Além disso, também é muito útil para testagem de muitas pessoas, como em escolas e empresas, pois o teste não demanda profissional de saúde qualificado, já que a amostra é coletada pelo próprio paciente. Ele oferece uma boa sensibilidade, um preço mais acessível e pouquíssimo incômodo para ser realizado, já que utiliza como amostra a saliva. Uma pessoa produz entre 600 mL e 1.000 mL de saliva por dia, e a única exigência para a coleta é um recipiente estéril.
Ainda com tantas evidências a favor do RT-LAMP, até o momento, o exame RT-PCR com amostra obtida da nasofaringe ainda é o “padrão-ouro” para o diagnóstico de COVID-19. Suas limitações, como a necessidade de profissional qualificado para realizar o teste e o incômodo da coleta, ainda são vistas como aceitáveis diante da alta especificidade e sensibilidade do teste.
Autor: Letícia Marsari
Instagram: @leticiamarsari
O texto é de total responsabilidade do autor e não representa a visão da sanar sobre o assunto.
Observação: material produzido durante vigência do Programa de colunistas Sanar junto com estudantes de medicina e ligas acadêmicas de todo Brasil. A iniciativa foi descontinuada em junho de 2022, mas a Sanar decidiu preservar todo o histórico e trabalho realizado por reconhecer o esforço empenhado pelos participantes e o valor do conteúdo produzido. Eventualmente, esses materiais podem passar por atualização.
Novidade: temos colunas sendo produzidas por Experts da Sanar, médicos conceituados em suas áreas de atuação e coordenadores da Sanar Pós.
Referências
Teste de Covid-19 por saliva é eficaz em crianças, mostra estudo:
Saliva as a Reliable Sample for COVID-19 Diagnosis in Paediatric Patients: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2021.03.29.21254566v1.full
FOUSP na mídia: rápido e indolor, o teste de covid-19 feito em casa: http://www.fo.usp.br/?p=73937
A scalable saliva-based, extraction-free rt-lamp protocol for sars-cov-2 diagnosis: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2020.10.27.20220541v1
Uso da saliva como um espécime alternativo para diagnóstico de COVID-19: uma revisão sistemática: https://www.archhealthinvestigation.com.br/ArcHI/article/view/5114#:~:text=Resultados%3A%20Ap%C3%B3s%20a%20leitura%20dos,e%20diagn%C3%B3stico%20de%20COVID%2D19
